hg8868皇冠国际的黑色素皮肤系统由正常的, 人源性表皮角质形成细胞(NHEK)和黑色素细胞(NHM)培养形成多层, 人表皮的高度分化模型. 共培养中的NHM发生黑色素形成，导致组织色素沉着. 黑素真皮是在无血清培养基中产生的，不含人工刺激黑素形成的物质，如TPA和IBMX. 培养物生长在空气-液体界面的组织培养插入物上, 允许局部应用皮肤美白剂或自晒黑剂. 黑种人提供了一种有用的体外手段来评估化妆品和药物制剂，旨在调节皮肤色素沉着.
黑皮具有与活体相似的形态和超微结构特征，具有均匀性和高度可复制性. 位于黑色素真皮基底细胞层的NHM是树突状的，自发产生黑色素颗粒，逐渐填充组织层. 培养3周, 黑色素真皮组织变得越来越色素沉着，保持正常上皮形态. Tissues containing NHM derived from black donors show increased pigmentation versus those containing Caucasian-derived or Asian-derived NHM; all three types of cultures are distinctly darker than NHM-free tissues (EpiDermTM). 局部应用已知的黑色素生成抑制剂可显著减少黑色素的产生和宏观变黑. Conversely, 组织内的NHM会对已知的黑色素生成刺激物产生反应, 如α-促黑素细胞激素和β-成纤维细胞生长因子, 产生的组织比未经处理的组织变黑得更快. 近20年来，黑种人的直接检测方法已被纳入实验室的整体检测策略. 有几十个技术参考资料可用, 越来越多的数据表明，黑种人提供了一种廉价而有效的评估皮肤色素沉着的方法，同时避免了物种外推和使用实验动物.
黑种人提供了一种廉价而有效的评估皮肤色素沉着的方法，同时避免了物种外推和使用实验动物. 简单的协议和早期细胞端点的评估使科学家能够在几天内获得数据, 不是几周或几个月.
美白
使用SOLVABLE™黑色素测定法进行定量测定以确定组织中的黑色素含量. 该试验可用于测试最终化妆品配方的皮肤美白功效.
色素的研究
黑种人已被用于研究皮肤色素沉着的生理机制.
Tissue:
Kit: 标准黑种人™试剂盒(MEL-300)由24个单独的组织组成，每个组织直径9毫米. (纸巾“包”包含纸巾, 少量培养基, and plasticware; contact hg8868皇冠国际 for specific kit contents.)
Substrate: 化学修饰，胶原蛋白包被，9毫米ID单孔组织培养板插入使用(e.g. Millicell CM或Nunc聚碳酸酯单孔组织培养板插入件).
培养:在气液界面.
播种率: Nhm: nhek = 1/10. 1/30的比例可根据要求提供.
Histology: 8-12个细胞层(基底层、棘层和颗粒层).
角质层: 10-15层(基于TEM).
很多数字: 每个技术员每周生产的纸巾批号被分配到一个特定的批号. 通常，任何一周的纸巾生产都有多个批号. 在批号的末尾附加一个字母，以区分给定批号中的单个试剂盒. 所有组织试剂盒在细胞方面都是相同的, medium, handling, 培养条件, etc.
Shipment: 在4°C培养基中，琼脂糖凝胶在24孔板中.
装运: 每星期一. 如有特殊要求，也可在星期四装运.
Delivery: 周二上午通过联邦快递优先服务(美国). 美国以外:周二至周三，视地点而定.
保质期: 包括运输时间在内，纸巾在使用前可在4°C下保存6天. 但是，除非必要，否则不建议延长储存期限. 除了, 如果组织在同一天连续使用，将获得最佳的再现性, e.g. 周二下午或之后在4°C下过夜(周三上午).
实验时长: 培养可持续至少2周，保持良好的正常表皮形态. 培养物必须每隔一天用5.0毫升新维护介质(NMM)或NMM-113. Cell culture inserts are placed atop culture stands (MEL-STND; see photo below) or washers (EPI-WSHR) in 6-well plates to allow use of 5.0 ml.
替代组织:
梅尔- 300: 与MEL-300相同，除了只有1个组织，而不是24个组织.
梅尔- 300 b - frzn ea: 经过3次冻融循环的MEL-300-B组织. 设计用于黑色素测定的对照.
MEL-301: 比MEL-300少培养3天，比MEL-300分化少
Mel-312 (-a， -b， -c): 与MEL-300 (-A， -B， -C)相同，除了每个试剂盒12个组织而不是24个.
Mel-606 (-a， -b， -c): 与MEL-300 (a)相同, -B, -C)除了每包6张纸巾, 每个组织在直径较大的细胞培养插入物(ID = 22 mm)中培养.
mel -300英尺(-a， -b， -c): Full-thickness human skin tissue model composed of fibroblast-containing collagen matrix (dermis); normal human epidermal keratinocytes and normal human melanocytes (epidermis). 每包24张纸巾.
Cells:
Types: a) Normal human epidermal keratinocytes (NHEK); b) Normal human melanocytes (NHM).
基因组成: NHEK和NHM分别来自不同的捐赠者. 含有匹配的NHEK和NHM的组织可根据特殊要求提供.
民族起源: 含NHM的白种人黑色素皮(MEL-300-C), 黑色(梅尔- 300 b), 以及亚洲(MEL-300-A)捐助者.
来自: Neonatal-foreskin组织.
选择: 有限数量的NHEK菌株 & NHM来自成人乳房组织.
筛选: 艾滋病毒，乙型肝炎和丙型肝炎.
Medium:
基础培养基: Dulbecco 's Modified Eagle 's Medium (DMEM).
生长因子/激素: 表皮生长因子, insulin, 氢化可的松, 以及其他专有的表皮分化刺激物.
Serum: None.
抗生素: 庆大霉素5µg/ml(为庆大霉素正常水平的10%).
抗真菌剂: 两性霉素B.25 µg/ml.
酸碱指示剂: Phenol red.
其他添加剂: 用于增强表皮屏障形成的脂质前体(专有).
选择: 无酚红(MEL-300-B-PRF), 不需抗生素(梅尔- 300 b -沛富), anti-fungal-free(梅尔- 300 b -等于off), 不含氢化可的松的培养基和组织(MEL-300-B-HCF)可用. 代理商至少在发货前3天被移除.
维护中: 有四种维护介质:
对于长期的实验，其中色素沉着和组织学是重要的, EPI-100-NMM的使用, epi - 100 nmm - 113, 或EPI-100-LLMM.
EPI-100-NMM(新维持培养基)含有保存组织学的KGF, 但不含任何直接促进色素沉着的因素.
epi - 100 nmm - 113含有KGF, β-FGF, 和α-MSH，促进色素沉着和组织保持.
长寿命维护介质EPI-100-LLMM含有α-MSH和β-FGF，但不含KGF. LLMM中组织变暗最快，NMM-113中变暗较慢，NMM中变暗最慢.
当使用NMM或NMM-113时，可以获得最佳的组织学保留, 培养物被喂饱了.每48小时0毫升培养基.
第四种媒介, EPI-100-MM, 是否为基础培养基，可用于短期毒理学试验. 它不含任何促进色素沉着的因素. EPI-100-MM不应用于以组织组织学为重要终点的实验.
质量控制和无菌:
目视检查: 所有组织都经过目视检查，如果发现物理缺陷, 纸巾被拒绝装运. 在显微镜下检查选择的组织，以确保黑色素细胞可见(对于MEL-300-B和MEL-300-A组织)，并确保它们均匀分布在整个组织中.
最终用途测试: 组织继续在EPI-100-LLMM中，以确保组织发生宏观变暗. 将组织暴露在1% Triton X-100中5小时. 每批组织的5小时存活率必须超过45%，由MTT测定(参见hg8868皇冠国际表皮™ET-50方案)确定.
Sterility: 在整个生产过程中使用的所有介质都要进行无菌检查. 维持培养基加或不加抗生素孵育1周，检查无菌性. 用于运输的24孔板上的琼脂糖凝胶也孵育1周，并检查任何污染迹象.
病原体筛查: 所有细胞都经过筛选，使用PCR检测HIV、乙肝和丙肝呈阴性. 然而，没有任何已知的测试方法可以完全保证细胞是无病原体的. Thus, 这些产品和所有人类衍生产品应按照CDC-NIH手册中建议的BSL-2(生物安全等级2)或更高级别处理, 微生物和生物医学实验室的生物安全,” 1998. 如需进一步帮助，请联系您的现场安全专员或hg8868皇冠国际技术服务.
不合格批件通知: 如果纸巾没有通过我们的质量检验或无菌检验, 我们会通知顾客，并在适当情况下免费更换纸巾. 因为我们的QC和无菌检测是在出货后完成的, 在一般情况下，我们会尽快发出通知, 可行性失败将在周三下午5点前通知.m.; sterility failures will be notified within 8 days of shipment).
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确保您的初始订单中包含最适合您应用的产品和配件, hg8868皇冠国际强烈建议您与我们训练有素的技术专家进行免费咨询. 请联系乔纳森Oldach订购黑种人产品.
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